動物癥狀觀察：

表現為體重減輕、弓背豎毛，在回輸后的一個月后死亡。

1、CCKBR基因敲除及高鹽飲食小鼠血壓情況

高鹽喂養8周后，通過左頸動脈插管法檢測小鼠的血壓，我們發現，胃泌素受體敲出小鼠的血壓相比于野生型小鼠明顯升高。給予高鹽飲食之后，胃泌素受體敲除小鼠的血壓進一步升高。而野生型小鼠的血壓沒有明顯升高。說明小腸CCKBR確實能夠參與小鼠血壓的調節。

2. CCKBR基因敲除及高鹽飲食小鼠尿鈉情況

我們使用代謝籠對四組小鼠的尿液進行收集并檢測，結果表明與野生型小鼠相比，胃泌素受體敲除小鼠的尿鈉水平降低。和給予高鹽飲食的野生型小鼠相比，給予高鹽飲食的胃泌素受體敲除小鼠的尿鈉水平也顯著降低。說明CCKBR基因敲除及高鹽飲食能夠誘導小鼠鈉水代謝異常，進而誘發高血壓。

3. CCKBR基因敲除及高鹽飲食小鼠小腸刷狀緣膜上NHE3調節蛋白的表達

為了進一步確定胃泌素受體敲除后，小腸絨毛刷狀緣膜上NHE3調節蛋白的作用，我們提取了CCKBR+/+小鼠和CCKBR-/-小鼠對照組和高鹽組小腸的膜蛋白，我們發現對照組CCKBR-/-小鼠和對照組CCKBR+/+小鼠相比，NHE3、NHERF1、NHERF2、NHERF3、ezrin和IRBIT的表達升高，高鹽飲食之后，CCKBR-/-小鼠小腸膜蛋白中NHE3、NHERF1、NHERF2、NHERF3、ezrin和IRBIT的表達進一步升高。這說明胃泌素受體缺失之后，胃泌素對NHE3調節蛋白的抑制作用消失，進一步誘發鈉水平衡失調以及高血壓的發生發展。

1、模型名稱：小腸CCKBR基因敲除鹽敏感性高血壓模型（CCKBR條件性敲除），名CCKBR-Vilin-Cre

2、品系來源：1.C57小鼠，C57-CCKBR-Vilin-Cre

對照：C57 -CCKBR-Vilin-FloxP

品系來源 ：1)遺傳背景及亞系:1921年Ltle用 AbbgLathrop的小鼠株雌鼠57號與雄鼠52號交配，而得C57BL6。亞系:C57BL6、C57B/6、C57BL/6N等。 (2)毛色基因標記：aa、BB、CC（黑色）

(3)主要遺傳學特征：a免疫學特征：一般飼養條件下免疫球蛋白的量隨年齡而增加，而到生后20個月時則1gG增長緩慢，無菌飼養的絕對量較低。gM水平較高，出生12月以后，有的個體超過80ug/mL。無菌飼養的動物lgM量比一般飼養的高。細胞免疫低下者少見，這可能與自發腫瘤少有關。b。形態學特征：在新生鼠中，雌鼠為16.8%，雄鼠3%為小眼或無眼癥。0.6%后肢可見多趾癥，另外水頭癥占2%4%，耳頭癥占0.4%，交合不全占3%。c生理學特性：有強嗜酒精性。對放射性照射為中等強度感應度，LD50為630+4R，將雄鼠皮膚移植到同系的雌鼠身上，約20日被排斥掉，這是因為在組織相容性抗原中的雄抗原在C57BL中非常顯著。d癌發生率：乳癌發生率低，為01%，白血病為7%-16%化學致癌成功率低，放射性照射較容易誘發肝癌。

3、誘導方法：利用Cre/LoxP（特異性重組酶系統）原理構建小腸CCKBR特異性敲除鼠（CKBR-Vilin-Cre），即在待翹除的目的基因CCKBR的DNA兩端各放置一個Loxp序列，得到flox小鼠（flankedby loxP），將flox小鼠與帶有小腸細胞特異性表達Cre的小鼠進行交配繁殖，已獲得在小腸把CCKBR敲除掉的CCKBR-Vilin-Cre小鼠。

8周齡CCKBR-Vilin-Cre小鼠及其對照CCKBR-Vilin-FloxP，分別給予高鹽飲食（8%的NaCl）和正常鹽飲食（4%的NaCl），連續8周，每周測量血壓。

高血壓是由多基因、多環境因素及個人不良習慣相互作用而導致的一種慢性復雜疾病，也是危害人類健康的主要疾病之一。鹽是高血壓的重要環境因素，個體對鹽負荷或限鹽呈現不同的血壓反應，因此存在鹽敏感性問題[1]。鹽敏感性是高血壓、心腦血管病和其它疾病（如哮喘、胃癌和腎功能不全等）發病及致死的一個潛在危險因素 [2]。因此在高血壓臨床診治過程中，考慮鹽敏感性將有利于對高血壓分類、危險分級以及對癥治療。

鹽敏感性通常涉及人口、種族、社會因素以及腎功能、激素水平和飲食習慣等[3]。不同種族和人群鹽敏感性個體的檢出率不同，而且血壓的鹽敏感性隨年齡增長而變化，特別是高血壓患者。鹽敏感性由Weinberger ADDIN EN.CITE[4]給出定義：靜脈滴注2L生理鹽水，測量平均動脈壓（MAP），次日早晨給予低鈉飲食后再測量MAP，兩次MAP相差≥10mmHg為鹽敏感性，否則為鹽耐受性。Yatabe ADDIN EN.CITE ADDIN EN.CITE.DATA [5]定義鹽敏感指數（SSI）為低鹽和高鹽飲食后MAP的差值與低鹽飲食MAP的商，若SSI≥5%為鹽敏感性。

高鹽攝入引起血壓升高主要有兩方面原因：一方面是腎小管對Na+ 重吸收增加，導致水鈉潴留，血漿容量增加，從而血壓升高；另一方面是內源性哇巴因物質分泌增多，特異性抑制鈉泵，胞內鈉離子濃度增加，Na+/Ca2+交換體被激活，細胞內Ca2+ 濃度升高，最終導致血管平滑肌或心肌收縮，引起高血壓[6]，可見鈉水調節紊亂是鹽敏感性高血壓發病的主要誘因。有研究表明，胃腸道在維持機體鈉水平衡方面具有重要的作用。人體胃腸道每天大約吸收7～9升液體，這一吸收過程主要是由鈉依賴的營養物質同向轉運體和鈉離子轉運體共同介導。在基礎狀態和進食后，小腸內鈉吸收主要是通過鈉氫交換體（NHE）。在小腸細胞的頂膜上，將腸腔內的鈉轉運至小腸細胞的電中性鈉氫交換體主要有NHE2、NHE3和NHE8，在結腸中主要的電中性鈉吸收通道為ENaC。在這些鈉吸收通道中NHE3是非常重要的一個鈉離子吸收通道。但小腸NHE3的特異性作用還不清楚。DR. Rieg構建了小腸特異NHE3敲除小鼠VillinCre, 并發現該小鼠成年率為0，均為出生后幾天死亡，證實腸道中NHE3調節鈉水平衡至關重要。

基于腸道NHE3對于機體鈉水平衡的調節作用，相關領域已經開展了NHE3抑制劑藥物用于高血壓治療的研究，但是NHE3抑制劑都存在明顯的副作用，大鼠及人體實驗證實NHE3抑制劑藥物能夠引發中度或重度腹瀉。已有測序研究發現NHE3編碼基因SLC9A3與先天性鈉腹瀉（CSD）密切相關，SLC9A3 基因N端鈉離子轉運結構域發生突變，能夠引發NHE3功能缺失，從而誘導CSD發生。提示直接抑制NHE3的藥物雖然能夠顯著降低血壓及鈉離子重吸收，但無法解決對機體的副作用。因此，我們研究通過其它通路間接抑制NHE3功能來降低血壓。最新研究發現，胃泌素不僅能夠調節胃酸分泌，還對機體內腎臟鈉氫交換體3（NHE3）等離子泵具有重要的調節作用。同時，我們實驗室先前的研究結果也表明，胃泌素能夠通過抑制NHE3活性參與機體鈉水代謝和血壓調節，從而改善鹽敏感性高血壓大鼠的血壓狀況。由于小腸中存在大量的胃泌素受體，因此我們采用基因工程的方法，敲除小腸道CCKBR基因以抑制胃泌素對NHE3活性的調節作用，從而造成胃腸道鈉水平衡的失調，誘導小鼠鹽敏感性高血壓模型。