給予動物鼠籠傾斜、潮濕墊料、高溫、噪音、束縛、電擊、游泳、晝夜節律顛倒等不同刺激因子，且刺激因子安排為多變性和不可預測，可誘導性是模型制造成功的關鍵。該模型被廣泛用于抑郁癥神經生物學機制及抗抑郁藥物的研究，以及伴發的焦慮、學習記憶障礙及防護藥物研究。

本研究中，通過水迷宮實驗、避暗實驗結果可以看CUMS模型組水迷宮尋臺潛伏期顯著性延長，避暗錯誤次數顯著性增加、避暗潛伏期顯著性減少等，這些行為學結果，提示大小鼠CUMS模型成功。此外本實驗還對CUMS模型的機制進行了基礎研究，認為CUMS模型會導致動物皮層的5-HT、DA、Ach、NE等神經遞質水平顯著性降低（P<0.05）。因此我們認為采用慢性不可預測應激，35天可以造成大鼠和小鼠學習記憶障礙。

模型技術難點在于對于CUMS刺激因子的選擇，刺激因子的選擇可能影響實驗模型的成功與否，常用的刺激因子有禁食(12 h)、禁水(12 h)、冷水游泳(4 °C，5 min)、熱水游泳(42 °C，5 min)、動物叫聲(0.5 h)、束縛(使用自行研發的小鼠行為限制器，長20 cm，直徑7 cm)、晝夜顛倒、配對飼養、濕籠、傾籠等。每日選擇2~3 種刺激，并盡量使應激程序符合不可預測的特點，以避免動物產生適應性。相同的刺激因子應該隔3-7日再進行。

本研究通過不同的刺激因子對老鼠造成慢性不可預測應激模型，通過水迷宮、避暗等經典行為學指標，以及5-HT、DA、Ach、NE等神經遞質基礎機制指標，表明了慢性不可預測應激誘導老鼠學習記憶損傷模型的成功，并且該模型對于大小鼠具有相同的效果，本模型可用于進一步的改善學習記憶藥物的藥效學評價。

本實驗采用健康成年SPF級老鼠。飼料墊料均為高壓滅菌產品，購自北京維通利華實驗動物有限公司，動物用水均經過除菌處理。實驗動物以完整的包裝直接進入實驗室，觀察適應5天后無異常情況，方進行實驗。實驗過程中動物操作均符合動物倫理學規范，對環境和生態影響等符合國家相關法律規定。

使用的品系：C57小鼠。制作的方法：戊四唑皮下或腹腔注射。

Katz[1]等在20世紀80年代早期開始慢性應激模型的研究，連續三周給予動物一系列高強度刺激因素如電擊、冰水游泳等，動物呈現抑郁狀態。Willner[2]等在此基礎上，降低了應激刺激的強度，延長應激時間，并將快感缺失測試作為該模型的主要評價方法，形成了慢性不可預測性溫和應激模型（CUMS）。應激因子包括晝夜節律的調整和光照性質的改變( 閃光、間斷光照)、食物和飲水的調整、環境的改變( 鼠籠傾斜、潮濕墊料、高溫、噪音、束縛、電擊足底、游泳等。應激因子的多變性和不可預測性是模型制造成功的關鍵。該模型被廣泛用于抑郁癥神經生物學機制及抗抑郁藥物的研究，以及伴發的焦慮、學習記憶障礙及防護藥物研究。研究發現，CUMS能夠造成小鼠空間學習記憶障礙[3]。

因此，本研究聚焦于CUMS對老鼠學習記憶的影響，采用Morris 水迷宮檢測慢性應激對大鼠依賴性空間學習記憶能力的影響；采用避暗行為學檢測慢性應激對小鼠記憶的獲得、鞏固、再現等過程。慢性應激對于Morris 水迷宮的影響，研究報道不盡一致。有研究發現慢性應激可損傷大鼠的空間學習記憶功能[4]。有報道認為，慢性應激可促進動物在Morris 水迷宮測試中的學習記憶功能[5]。本研究采用Morris 水迷宮檢測慢性應激對大鼠空間學習記憶能力的影響。避暗實驗是利用嚙齒類動物趨暗避明的習性設計，動物進入暗室即遭足底電擊，反復數次后形成條件反射[6]。這種厭惡性條件反射形成快且恐懼記憶持續時間長，是較為敏感的學習記憶評價方法。本研究利用避暗實驗評價CUMS 小鼠模型的認知功能損傷。

目前，文獻報道的CUMS刺激因子刺激因子的多變性、不可預見性是模型成功的關鍵，單獨使用一種刺激不能產生理想的效果，每種刺激因子應間隔3～7 d[7]，大部分CUMS造模過程都選擇了7-11種刺激因子，只有少數實驗選擇了≥12或≤6種的刺激因子，最少的用了4種，最多的用了14種。造模周期有2-8周不等，其中以3-6周最為常見。本模型選用適宜的造模時間-35天，以及常用的幾種刺激因子，確定該模型誘導的認知障礙模型為現代人類長期處于慢性不可預測應激作用下誘發的學習記憶減退機理研究、防護和藥物研究提供實驗模型。

參考文獻：

[1] KATZ R.Animal model of depression: pharmacological sensitivity of a hedonic deficit[J]. Pharmacol Biochem Behav, 1982, 16(6): 965-8.

[2] WILLNER P.Validity, reliability and utility of the chronic mild stress model ofdepression: a 10-year review and evaluation [J]. Psychopharmacology (Berl),1997, 134(4): 319-29.

[3] 瞿禮萍, 曾南, 梁珂, 等. 逍遙散對慢性溫和應激模型小鼠行為學及空間學習記憶能力的影響[J]. 中藥藥理與臨床, 2007,23(5):18-21.

[4] CUADRADO-TEJEDOR M, RICOBARAZA A,DEL RIO J, et al. Chronic mild stress in mice promotes cognitive impairment andCDK5-dependent tau hyperphosphorylation [J]. Behav Brain Res, 2011, 220(2): 338-43.

[5] GOUIRAND A M, MATUSZEWICH L. Theeffects of chronic unpredictable stress on male rats in the water maze [J].Physiology & Behavior, 2005, 86(1-2): 21-31.

[6] SHULZ D,CHERNICHOVSKY D, ALLWEIS C. A novel method for quantifying passive-avoidance behaviorbased on the exponential distribution of step-through latencies [J]. PharmacolBiochem Behav, 1986, 25(5): 979-83.

[7] Willner P．Chronic mildstress ( CMS) revisited: Consistency and behavioural-neurobiologicalconcordance in the effects of CMS[J]. Neuropsychobiology，2005, 52(2) :90-110．