作者：顧佳琴

《中華人民共和國藥典》2020年版四部中規(guī)則：常用的滅菌方法有干冷滅菌法、干熱滅菌法、輻射滅菌法、氣體滅菌法、過濾除菌法、汽相滅菌法、液相滅菌法。可依據被滅菌物品的特性采用一種或多種方法組合滅菌。嚴厲的滅菌操作十分重要，會影響整個實驗能否順利的展開，筆者依據日常實踐操作狀況選擇了相順應的滅菌方法停止操作，并對其方法停止了匯總如下：

一、干冷滅菌

經過熱蒸汽或沸水使細菌蛋白質、核酸變性而殺滅微生物的方法。

分為三種：

1、煮沸滅菌：加熱使水至沸而殺滅細菌的方法。凡不適于高壓蒸汽滅菌的物品可常壓下在水中煮沸一段時間到達滅菌目的。

2、流通蒸汽滅菌：常壓下，用蒸籠、蒸鍋等在100℃滅菌。僅可殺死細菌繁衍體，不能完全殺滅芽孢。

3、高壓蒸汽滅菌：經過加壓提高蒸汽溫度，穿透力強、溫度高、滅菌效果*好。是*牢靠*適用*普遍的滅菌方法，普通采用121℃高壓滅菌15～20min或許116℃高壓滅菌30min。培育基、膠塞、玻璃器材等凡耐高平和濕潤的物品可運用本法滅菌。滅菌時，容器不可密封，需與滅菌鍋內空氣流通。完全排出高壓滅菌器內的冷空氣。（冷空氣存在時，同一表壓下所到達的溫度值偏低，不契合規(guī)則的要求，滅菌就不徹底）。

二、干熱滅菌

應用熱空氣傳遞或高溫灼燒停止的滅菌，殺死微生物和芽孢。

分為二種：

1、灼燒主要用于接種工具滅菌，如接種針、接種環(huán)、刀、剪、等在火焰上炙烤即可到達徹底滅菌。將試管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等在火焰旁停止無菌操作，應用火焰對管口等停止滅菌，防止管口污染，作為無菌操作進程中的輔佐滅菌手腕。

2、干熱空氣滅菌是應用熱輻射及干熱空氣停止滅菌，普通運用于金屬物品、玻璃器材等不能與蒸汽接觸的物品滅菌，須在160℃～170℃左右堅持恒溫2～3小時。

三、紫外線滅菌

應用紫外燈停止輻射滅菌。可以對微生物蛋白質的破壞使其滅活。

1、在實踐操作中，無菌室內的污染任務臺、生物平安柜、傳遞窗等裝置紫外燈。普通僅起殺死空氣中、物體外表、空中等局部微生物的作用，紫外線輻射的穿透力很弱，而不能起到完全滅菌的作用。

2、紫外線消毒方法驗證中紫外燈需確認的參數主要有紫外線的波長、紫外線強度、燈管的壽命。

3、紫外燈消毒的效果與紫外線強度、照射時間、溫度與濕度等要素有關，還需經過驗證來確定。

4、紫外線直射對眼、皮膚有損害。紫外線照射進程中發(fā)生臭氧，臭氧過多對眼及鼻腔有撫慰，發(fā)生頭暈、胸悶、血壓降低，所以無菌室及污染任務臺紫外線照射中止后，請稍等片刻，讓臭氧流失，方可停止實驗操作。

四、除菌過濾

以物理的方法除去介質中的微生物。常將空氣或液體中的微生物及雜質用不同資料制成的薄膜濾器過濾失掉無菌、無雜質的空氣或液體。

濾過細菌的濾膜孔徑為0.22μm（或更小孔徑或相反過濾效能）。

總結：在檢驗進程中，無論采用什么方法，都應思索到原有成分的動搖性和平安性，對滅菌條件除了要求經濟性、環(huán)保性和滅菌徹底外，還要必需保證被滅菌物質成分不被破壞。不影響物品的質量。

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